小鼠硫酸轉移酶(SULT)ELISA檢測試劑盒技術說明書

　　小鼠硫酸轉移酶(SULT)ELISA檢測試劑盒技術說明書

　　BS-9421小鼠硫酸轉移酶(SULT)ELISA試劑盒

　　一、產品概述

　　本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)，專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中硫酸轉移酶(SULT)的活性水平。?僅供科研使用?，不可用于臨床診斷。

　　二、實驗原理

　　雙抗體夾心法?：微孔板預包抗小鼠SULT捕獲抗體，樣本中SULT與其結合后，加入生物素標記的檢測抗體形成“抗體-抗原-抗體”復合物。

　　酶聯顯色?：加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素，催化底物TMB顯色，顏色深淺與SULT濃度呈正相關。

　　定量檢測?：酶標儀450nm波長測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣本濃度。

　　三、試劑盒組成

　　組分 規格(48孔/96孔) 保存條件

　　酶標包被板 1×48/1×96 2–8℃

　　標準品(80U/L) 0.3ml×6管 2–8℃

　　酶標試劑(HRP標記) 5ml/10ml 2–8℃

　　顯色劑A液 3ml/6ml 2–8℃

　　顯色劑B液 3ml/6ml 2–8℃

　　終止液 3ml/6ml 2–8℃

　　濃縮洗滌液(20×) 15ml/25ml 2–8℃

　　封板膜、密封袋 2片/1個 室溫

　　四、樣本處理

　　血清/血漿?：

　　室溫靜置10–20分鐘，2000–3000轉/分離心20分鐘，取上清液。

　　避免反復凍融，建議分裝后-80℃保存。

　　組織勻漿?：

　　組織加入生理鹽水搗碎，1000×g離心33分鐘，取上清液。

　　細胞上清液?：

　　1000×g離心32分鐘去除顆粒，取澄清液。

　　五、實驗步驟

　　標準品稀釋?：用標準品稀釋液將標準品梯度稀釋為6個濃度點(80–0 U/L)。

　　加樣與溫育?：

　　每孔加入100μL標準品/樣本(建議復孔)。

　　37℃避光溫育90分鐘。

　　洗滌?：棄去孔內液體，用洗滌液浸泡30秒后拍干，重復3次。

　　顯色與終止?：

　　每孔加入顯色劑A/B液各50μL，37℃避光顯色15分鐘。

　　加入終止液50μL終止反應。

　　檢測?：酶標儀450nm波長測定OD值，通過標準曲線計算樣本濃度。

　　六、注意事項

　　試劑平衡?：冷藏試劑需室溫平衡15–30分鐘后再使用。

　　操作規范?：

　　避免氣泡產生，加樣時貼壁緩慢加入。

　　濃縮洗滌液如有結晶，可水浴加熱助溶。

　　安全防護?：

　　終止液含強酸，需佩戴手套操作。

　　實驗區域禁止飲食、吸煙。

　　質量控制?：

　　每板需設空白孔和標準曲線孔。

　　板內/板間變異系數應<10%。

　　七、結果計算

　　以標準品濃度(U/L)為橫坐標，OD值為縱坐標繪制四參數擬合曲線。

　　樣本濃度=曲線方程OD值代入結果×稀釋倍數。

　　八、保存與有效期

　　未開封試劑盒：2–8℃保存6個月。

　　已開封酶標板：密封袋裝2–8℃保存≤1個月。

　　注：以上僅供參考，不作為實際數據，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

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