人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒實驗說明書

　　一、產品基本信息

　　BS-0245人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒

　　檢測原理

　　采用雙抗體夾心ELISA法：

　　預包被單克隆抗體捕獲樣本中SAM抗原

　　生物素標記多克隆抗體作為檢測抗體

　　TMB顯色系統(450nm測定)實現定量分析

　　試劑盒組成

　　組分規格/說明

　　預包被微孔板96孔/板(可拆卸)

　　SAM標準品0-1000pg/ml梯度濃度

　　生物素標記抗體100×濃縮液

　　HRP-親和素結合物100×濃縮液

　　TMB底物液避光保存

　　終止液2Mliusuan溶液

　　二、實驗操作流程

　　樣本預處理

　　血清/血漿：EDTA抗凝，1000×g離心15分鐘

　　細胞上清：去除沉淀后-70℃分裝保存

　　標準曲線制備

　　步驟參數

　　稀釋標準品按1:3梯度稀釋(建議7個濃度點)

　　加樣量每孔100μl

　　孵育條件37℃ 60分鐘

　　檢測步驟

　　1. 加樣：標準品/樣本→生物素抗體→HRP結合物 2. 洗滌：PBST緩沖液洗板5次(每次浸泡30秒) 3. 顯色：TMB避光反應15分鐘→終止液終止

　　三、質量控制要求

　　指標可接受標準

　　標準曲線R2值≥0.990

　　板內CV≤10%

　　板間CV≤15%

　　回收率85-115%

　　四、注意事項

　　關鍵操作

　　避免反復凍融標準品(建議分裝儲存)

　　顯色時間需精確控制(±30秒誤差)

　　安全警示

　　終止液具有強腐蝕性(需佩戴護目鏡)

　　廢液需用10%NaOH中和后處理

　　數據判讀

　　建議使用四參數擬合算法(4PL)

　　溶血/脂血樣本需備注說明

　　注：以上資料僅供參考，具體請咨詢品牌供應商或技術老師。

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