雞孕酮（PROG）Elisa試劑盒說明書

　　以下是雞孕酮(PROG)ELISA試劑盒說明書的核心內容及操作要點，綜合整理自多個廠商資料及技術文檔?：

　　一、試劑盒基本信息?

　　檢測原理?：雙抗體夾心法(主流)或競爭法，通過HRP酶催化TMB顯色，450nm波長測OD值定量?。

　　檢測范圍?：通常為78-5000pg/mL或100-2500pmol/L(不同品牌有差異)?。

　　樣本類型?：適配雞血清、血漿、組織勻漿、細胞上清等，需避免反復凍融?。

　　二、關鍵組分清單?

　　組分? ?作用? ?保存條件?

　　包被微孔板 預固相化抗體，捕獲抗原 2-8℃干燥保存?

　　HRP標記檢測抗體 與抗原結合，催化顯色反應 避光4℃?

　　TMB底物液 顯色劑(A/B液需1:1混合) 避光4℃?

　　終止液(稀硫酸) 終止反應，穩(wěn)定黃色產(chǎn)物 室溫?

　　三、樣本處理規(guī)范?

　　血清/血漿?：

　　全血室溫靜置2小時或4℃過夜，1000g離心20分鐘取上清?。

　　抗凝劑推薦EDTA或肝素，避免使用NaN3(抑制HRP活性)?。

　　組織勻漿?：

　　按1:9(重量:體積)加入PBS勻漿，5000g離心10分鐘取上清?。

　　細胞上清?：

　　分泌性成分直接離心收集;胞內成分需反復凍融裂解細胞?。

　　四、實驗步驟概要?

　　標準品稀釋?：凍干品用1mL稀釋液復溶，梯度稀釋至7個濃度(如5000pg/mL→78pg/mL)?。

　　加樣溫育?：

　　每孔依次加入樣本/標準品50μL→檢測抗體50μL，37℃孵育1小時?。

　　洗滌?：

　　使用30倍稀釋的濃縮洗滌液，每孔300μL洗5次，拍干?。

　　顯色與終止?：

　　加入TMB底物100μL，避光反應15分鐘→加終止液50μL?。

　　五、注意事項?

　　質量控制?：批內CV<10%，批間CV<12%為合格?。

　　干擾規(guī)避?：溶血、脂血樣本需預處理;細菌污染易致假陽性?。

　　數(shù)據(jù)擬合?：建議使用四參數(shù)邏輯曲線(4PL)計算濃度?。

　　六、技術支持?

　　部分廠商提供代測服務(如BUNSEN本生)及實驗問題咨詢?。

　　如需完整說明書，可聯(lián)系供應商獲取PDF文檔(例：雞孕酮檢測說明書)?。

　　注：以上資料僅供參考，如需進一步技術支持，可聯(lián)系供應商獲取服務或實驗指導?。