資料簡介
流動相配制:根據分析需求,準確配制合適比例的流動相。例如,反相色譜常用甲醇 - 水體系,配制時需使用高純度試劑和超純水,并通過 0.22μm 或 0.45μm 濾膜過濾,去除顆粒雜質,隨后進行超聲脫氣 15 - 30 分鐘,防止氣泡進入系統影響分析。
色譜柱選擇與安裝:依據樣品性質挑選適配的色譜柱,如 C18 柱適用于多數極性和非極性化合物分離。安裝前,需用合適的溶劑以低流速沖洗色譜柱,去除保存溶劑和可能存在的雜質,再正確連接到儀器上。
儀器檢查:開機前,檢查輸液系統管路是否連接緊密、有無漏液;進樣器是否清潔;檢測系統波長范圍是否符合要求等,確保儀器各部件處于正常狀態。
開機:依次打開輸液泵、檢測器、柱溫箱(若有)等部件電源,待儀器自檢完成,設定流動相流速、柱溫、檢測波長等參數。例如,一般流速設定在 0.5 - 1.5mL/min,柱溫控制在 25 - 40℃,檢測波長根據樣品吸收特性確定。
平衡系統:以設定流速沖洗色譜柱和系統,使基線穩定。此過程通常需要 30 分鐘至 1 小時,直至基線波動在規定范圍內,如紫外檢測器基線噪聲小于 ±0.001AU。
進樣分析:使用微量注射器或自動進樣器準確吸取樣品溶液,注入進樣口。自動進樣器可設置進樣體積、進樣序列等參數,確保進樣的準確性和重復性。樣品隨流動相進入色譜柱分離后,經檢測器檢測,數據處理系統實時記錄并生成色譜圖。
結果處理:根據色譜圖中峰的保留時間進行定性分析,與標準物質對比確定樣品組分;通過峰面積或峰高,結合校準曲線進行定量計算,得出樣品中各組分的含量。
清洗系統:分析結束后,先用高比例水相沖洗系統 30 分鐘,去除殘留的緩沖鹽,再用純有機相(如甲醇或乙腈)沖洗 30 分鐘,防止鹽類結晶和有機物殘留堵塞管路和色譜柱。
關機:依次關閉檢測器、輸液泵、柱溫箱等部件電源,最后關閉儀器總電源。若長時間不使用,需將色譜柱取下,兩端密封保存。
液相色譜儀通過嚴謹的操作和維護,能為復雜樣品的分析提供準確可靠的數據。若你想了解某一操作步驟的更多細節,歡迎隨時交流。





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