資料簡介
以下是關于人白介素12(IL-12)ELISA試劑盒的說明書核心內容整理:
一、檢測原理?
采用雙抗體夾心法,通過預包被抗人IL-12抗體捕獲樣本中的IL-12,再與生物素標記的二抗及HRP酶聯物結合,最終經TMB顯色定量檢測。
二、試劑盒組成?
組分? ?規格? ?保存條件?
預包被酶標板 96孔/板(12孔×8條) 2-8℃干燥保存
重組IL-12標準品 2ng/瓶或10ng/管 -20℃凍存
HRP標記檢測抗體 6-12ml/瓶 2-8℃避光
TMB底物液 12ml/瓶 2-8℃避光
20×濃縮洗滌液 50ml/瓶 室溫(使用前稀釋)
三、樣本要求?
類型?:血清、血漿(EDTA/肝素抗凝)、細胞上清液、組織勻漿
處理?:
避免溶血或反復凍融;
含NaN3的樣本需透析處理(NaN3抑制HRP活性);
短期保存于-20℃,長期保存需-80℃。
四、操作步驟?
標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(如60ng/L→3.75ng/L);
加樣溫育?:
樣本/標準品50μL/孔,37℃孵育60分鐘;
加入HRP標記抗體100μL/孔,繼續孵育60分鐘;
洗滌?:手工洗板需重復5次,拍干;
顯色?:加入TMB底物50μL/孔,避光反應15分鐘;
終止與檢測?:加終止液50μL/孔,15分鐘內450nm測OD值。
五、技術參數?
項目? ?規格?
檢測范圍 15.63-2000pg/mL(不同品牌差異)
靈敏度 <5.47pg/mL
批內/批間精密度 CV<8%/CV<10%
有效期 6個月(2-8℃保存)
六、注意事項?
安全操作?:
避免接觸終止液(含硫酸)和TMB底物,接觸后立即沖洗;
質量控制?:
標準曲線R2需≥0.99;
空白孔OD值應<0.1。
適用范圍?:僅限科研,不用于臨床診斷。
如需具體品牌操作細節,請參考對應試劑盒說明書。
注:以上資料僅供參考,不作為實際標準,如需更詳細的標準對比,可進一步詢技術老師或是供應品牌商。
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