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        人血管內皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒使用說明書

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          2025年05月07日
        關鍵詞
        血管內皮生長因子,VEGF 試劑盒,標準品,酶標板(96孔),HRP標記抗體
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        資料簡介

          以下是關于人血管內皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:

          BS-10001  人血管內皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒

          一、實驗原理

          采用雙抗體夾心法,通過預包被在酶標板上的抗VEGF抗體捕獲樣本中的VEGF,再與HRP標記的檢測抗體形成復合物,經TMB顯色后測定OD值,濃度與顏色深淺成正比。

          二、試劑盒組成

          核心組分‌:預包被酶標板(96孔)、標準品(40ng/瓶)、HRP標記抗體、TMB底物、終止液

          輔助溶液‌:20×濃縮洗滌液(需1:20稀釋)、10×標本稀釋液(需1:10稀釋)

          三、樣本處理

          血清/血漿‌:3000rpm離心10-30分鐘,避免反復凍融

          細胞上清‌:離心去除顆粒物,分裝保存于-20℃

          組織勻漿‌:生理鹽水搗碎后離心取上清

          四、標準品配制

          標準品用1ml蒸餾水復溶(40ng/ml)

          梯度稀釋:依次進行對倍稀釋(62.5-2000pg/mL)

          五、實驗步驟

          加樣‌:標準品/樣本各100μL,37℃溫育2小時

          洗滌‌:手工洗板需浸泡1-2分鐘,重復3-5次,拍干

          顯色‌:

          加TMB底物90μL,避光反應15-25分鐘

          終止反應后立即測定450nm OD值

          六、注意事項

          保存條件‌:試劑盒2-8℃保存,使用前室溫平衡60分鐘

          交叉污染‌:使用一次性吸頭,避免金屬接觸終止液

          質量控制‌:板內變異系數<10%,板間<15%

          七、結果計算

          以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,通過回歸方程計算樣本濃度。

          注:本試劑盒僅限科研使用,不可用于臨床診斷。

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