概念解析
消毒：用物理或化學方法殺死物料、容器、環(huán)境中的一切病原微生物(表面)一般只能殺死營養(yǎng)細胞而不能殺死細菌芽孢。
滅菌：用物理或化學方法殺死或除去所有微生物。
除菌：采用過濾方法除去空氣或液體中的微生物或孢子。
類別：熱滅菌法、輻射滅菌法、化學滅菌法、過濾除菌法。
一、熱滅菌法
1、干熱滅菌
概念：在紅外線或電熱作用下，在設備內加熱，主要用于保持干燥的物料、器具等滅菌。
方法：常用在烘箱內，烘箱內的溫度160~170度，維持1~2小時。
注意：不能超過180度、滅菌物體不能放得太緊、降溫時緩緩進行、溫度降到80度以下時才能開烘箱門。
缺點：干熱的穿透力弱，微生物對干熱的時受力比濕熱強很多，需要的滅菌溫度相比較要高，時間要長。
火焰滅菌：采用火焰直接殺死微生物。如接種針、接種環(huán)等的滅菌，該方法應用范圍有限
2、濕熱滅菌
概念：借助蒸汽釋放的熱，使微生物細胞中的蛋白質、核酸、酶分子內的化學鍵，特別是氫鍵受到破壞，引起不可逆的變性，使微生物死亡。
熱阻：微生物在某一種條件下的致死時間。
范圍：廣泛用于生產設備、培養(yǎng)基的滅菌。
同溫下相對于干熱滅菌，殺菌效力更強。
原因：(1)濕熱條件下，菌體吸收水分，蛋白質更易凝固。因為含水量加大，所需凝固溫度降低(2)濕熱蒸汽的穿透力大(3)濕熱的蒸汽有潛熱存在。
濕熱滅菌類別：煮沸滅菌法、巴氏消毒法、間歇式、高壓蒸汽滅菌法等。
百侖GMP疫苗發(fā)酵罐(全自動滅菌)
煮沸法
將要消毒的物品放入水中煮沸 (100度) 。
煮沸時間：15—20分，殺死微生物營養(yǎng)細胞。1—2h, 殺死芽孢，加碳酸鈉或石炭酸(0.5%)。
對象：適用食品或器材的消毒。
巴氏消毒法
待消毒的物體在60-62 加熱30min或在70℃加熱15min, 殺死病原菌和一部分微生物。
對象：牛奶、啤酒、黃酒、醬油等食品。
特點：不損害某些食品的營養(yǎng)價值和色香味。
舉例：啤酒的滅菌。
間歇滅菌法
采用反復幾次常壓蒸汽滅菌法，殺死微生物營養(yǎng)體和芽孢。
方法：待滅菌物品，放入滅菌器中加熱到 100℃, 維持30-60min, 取出，冷卻，37℃恒溫箱中培養(yǎng)1 小時，次日同法處理。共三次。
對象：不宜高壓滅菌的物質。如糖類明膠牛奶培養(yǎng)基等
高壓蒸汽滅菌
主要使用密閉的高壓蒸汽滅菌鍋。使用廣泛。
方法：壓力O.1MPa, 溫度121度，維持15—30min。
注意：滅菌完畢，緩緩減壓。
百侖30TGMP生物反應器(全自動滅菌)
濕熱滅菌優(yōu)缺點
優(yōu)點：蒸汽來源容易、蒸汽穿透力強，滅菌徹底、蒸汽有很大潛熱、可調節(jié)壓強。
缺點：設備費用高，不能用于怕受潮的物料的滅菌。
二、輻射滅菌法
概念：利用高能量的電磁輻射和微粒輻射來殺死微生物。紫外線最為常用。
適用：接種室，超凈工作臺、無菌培養(yǎng)室及物質表面。
注意：紫外線穿透率力底，只能用于表面滅菌。30W紫外線燈照射30min , 可取到殺菌效果。一般和化學試劑合用。
原理：使微生物的DNA鏈斷裂，破壞核糖和磷酸的連接引起DNA分子內或分子間氫鍵斷裂，使微生物死亡。
三、化學滅菌法
概念：化學藥品直接作用于微生物將其殺死的方法。
范圍：生產車間、無菌室、實驗室、接種前的小型器具及手的消毒。
方法：浸泡、添加、擦拭、噴灑等。
原理：化學物質容易與微生物細胞中的某種成分產生化學反應。如蛋白質變性、晦類失活、破壞細胞膜通透性，殺滅微生物。
注意：不適合培養(yǎng)基的滅菌，適用于局部空間或器械的滅菌。
四、過濾除菌法
概念：利用細菌不能通過致密具孔濾材的原理，以除去氣體或液體中微生物。
范圍：常用于氣體、熱不穩(wěn)定的藥品溶液或原料的除菌。主要用于血清、抗生素等不耐熱生物制品及空氣的除菌。
器具：所用的器具是含有微小孔徑的濾菌器。常用的濾菌器有薄膜濾菌器(0.45μm和0.22μm孔徑)、陶瓷濾菌器、石棉濾菌器(即Seitz濾菌器)、燒結玻璃濾菌器等。
過濾除菌法分為絕對過濾和深層過濾。
絕對過濾：是過濾介質的濾孔小于固體顆粒，把顆粒截留。
深層過濾：介質濾孔不一定小于固體顆粒，它是藉濾層內的曲折通道，把顆粒截留。
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