蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法代測詳解-齊一生物

氨基酸是含有氨基和羧基的一類有機化合物的通稱。生物功能大分子蛋白質的基本組成單位，是構成動物營養所需蛋白質的基本物質。是含有堿性氨基和酸性羧基的有機化合物。氨基連在α-碳上的為α-氨基酸。組成蛋白質的氨基酸均為α-氨基酸。
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法測定原理：
大多數蛋氨酸（甲硫氨酸）本身不能發射熒光，又不具有紫外吸收的特性，需要制成某初中形式的衍生物后才能檢測。本說明書中運用蛋氨酸（甲硫氨酸）與 PITC 柱前衍生，紫外檢測器 254nm 波長下檢測 。
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法 試劑的組成和配制： 
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法實驗前的準備工作：
蛋氨酸（甲硫氨酸）的提取：
（1）游離蛋氨酸（甲硫氨酸）的提取：
（2）結合態蛋氨酸（甲硫氨酸）提取：
蛋氨酸（甲硫氨酸）的衍生：
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量測定操作步驟：
1、 開啟電腦、檢測器和泵，安裝上色譜柱，打開軟件，在方法組中設置進樣量，設置完畢保存方法組。
2、 用流動相過柱子，待基線穩定后開始加樣。
3、 加入標準品，分離蛋氨酸（甲硫氨酸），（柱子不同，保留時間有差異）。
4、 加入樣品 ，在相應保留時間處檢測蛋氨酸（甲硫氨酸）的峰面積。
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法含量的計算：
樣本溶液中各種蛋氨酸（甲硫氨酸）濃度(ug/mL)=f1/f2*C F1=樣本溶液中個蛋氨酸（甲硫氨酸）峰面積/內標峰面積
F2=混合蛋氨酸（甲硫氨酸）標準品溶液中各蛋氨酸（甲硫氨酸）峰面積/內標峰面積  C=混合蛋氨酸（甲硫氨酸）標準品中個蛋氨酸（甲硫氨酸）濃度
蛋氨酸（甲硫氨酸）含量高效液相色譜法注意事項：
1、 為了避免使用過程中柱壓變化過大，流速由小到大調節。
2、 使用完畢后，需用純乙腈沖洗柱子 30min，防止無機鹽結晶堵塞色譜柱。
3、 在儀器操作過程中，要時刻注意柱壓的變化，防止柱壓過高，損害儀器。